Фамилия Двушерстов — один из тех редких случаев, когда прозвище, лёгшее в основу, почти не требует расшифровки. В ней отчётливо слышится числительное «два» и слово «шерсть». Скорее всего, перед нами прозвище человека, имевшего какое-то отношение к двум видам или сортам шерсти. В крестьянском быту это могло означать владельца овец с разным руном (например, тонкорунной и грубошёрстной породы) либо торговца, который вёл дело с двумя разными поставщиками или типами сырья. Прозвище давали по самому характерному занятию или имуществу, и «Двушерст» — яркая тому иллюстрация.

Модель образования типична для русских фамилий: к основе «Двушерст» добавили патронимический суффикс -ов, то есть «сын Двушерста». Окончание -ов указывает на то, что фамилия сложилась в центральных или северных великорусских землях, где преобладала именно эта модель, в отличие от украинских и белорусских фамилий на -енко или -ук.

Интересно, что фамилия почти не встречается в массовых списках, что говорит о её редком, локальном происхождении. Вероятно, она возникла в одной из овцеводческих губерний — например, в тех районах Воронежской, Тамбовской или Саратовской губерний, где разводили овец и где ценили шерсть. Второй, менее правдоподобный вариант — прозвище могли дать портному или скорняку, работавшему с двумя разными мехами, но шерсть в прозвище указывает скорее на сырьё, а не на готовое изделие.

С точки зрения словообразования, фамилия стоит в ряду таких же «числовых» прозвищ по ремеслу: Двужильный, Двуреченский, Двугрошов. Но если Двужильный намекал на силу, а Двугрошов — на цену, то Двушерстов — единственный, кто прямо указывает на занятие, связанное с овцеводством. Среди носителей фамилии, судя по скудным архивным записям, преобладали государственные крестьяне и однодворцы — сословие, которое в XIX веке активно занималось мелким скотоводством и ремеслом.