Фамилия Гладушин образована от прозвища Гладуш или Гладуша. В её основе лежит украинское или южнорусское слово «гладуш» — так называли глиняный горшок, крынку, а в переносном смысле — полного, упитанного человека. Слово родственно прилагательному «гладкий» в значении «толстый, тучный», которое в старых говорах не имело сегодняшнего отрицательного оттенка, а просто описывало крепкое телосложение. Так что первый носитель фамилии, скорее всего, был человеком плотным и дородным, и это не считалось обидным прозвищем.

Суффикс -ин указывает на типичную восточнославянскую модель: Гладуш + -ин = «чей?» — сын или потомок Гладуша. Такие фамилии чаще всего закреплялись за крестьянами и мещанами, особенно на территориях, где были сильны украинские и белорусские диалекты. Если бы основа звучала как Гладушко, мы бы получили фамилию Гладушко, но здесь уменьшительная форма на -уш дала именно Гладушин.

Географически фамилия тяготеет к западнорусским и украинским землям. Встречается в документах XVIII–XIX веков среди казаков Черниговщины и Полтавщины, а также среди переселенцев на Кубань. В отличие от фамилий на -ов (Гладушов), вариант с -ин реже, но именно он лучше сохраняет исходное прозвище без дополнительного суффикса.

Есть и другая, менее вероятная версия: от имени Глад, сокращённой формы от Гладимир или Гладослав. Но такие имена в славянском именослове редки, а прозвище от утвари или внешности — намного естественнее для народной ономастики. Так что основная история фамилии — это история о человеке, которого в округе знали как Гладуша, то есть «горшка» или «толстяка», и чьи дети стали Гладушиными.