Фамилия Золотушкина — женская форма фамилии Золотушкин, и её происхождение напрямую связано с медицинским термином «золотуха». В современном языке это слово звучит как архаизм, но в XIX веке золотухой называли одно из распространённых детских заболеваний (скрофулёз, форма туберкулёза лимфатических узлов). Прозвище Золотушка могли дать ребёнку, который часто болел, или, наоборот, взрослому, выжившему после тяжёлой болезни и носившему следы на коже.

Однако есть и менее очевидная версия. В некоторых говорах «золотухой» называли не болезнь, а растение — чистотел (за жёлтый сок). Прозвище Золотушка мог получить знахарь, лечивший золотушных детей этим растением, или просто человек, живший рядом с зарослями чистотела. Третья, самая редкая версия — от слова «золото» с уничижительным суффиксом -ух(а): так могли в насмешку прозвать бедняка, мечтавшего о богатстве, либо, наоборот, скупого человека, «дрожавшего над каждой золотой монетой».

Суффикс -ин в фамилии указывает на принадлежность: Золотушкин — сын или потомок Золотушки. Такая модель типична для русских фамилий, образованных от прозвищ или имён, оканчивающихся на -а/-я (ср. Пушкин, Бородин). Географически фамилия встречается рассеянно, без ярко выраженного ареала, что характерно для прозвищ, связанных с болезнями: их давали повсеместно, но относительно редко — не каждый хотел закрепить за родом память о недуге.

Если сравнивать с однокоренными фамилиями — Золотов, Золотарев, Золотухин, — то Золотушкины стоят особняком. Золотухин образован от того же корня «золотуха», но с другим суффиксом, и встречается чаще. Золотушкин — более редкий вариант, сохранивший уменьшительно-пренебрежительный оттенок прозвища. Сословных ограничений у фамилии не было: её могли носить и крестьяне, и мещане, и купцы, если прозвище закрепилось за родом.